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細(xì)胞治療產(chǎn)品自動(dòng)化分析技術(shù):Ella全自動(dòng)微流控ELISA技術(shù)

發(fā)布日期:2024-10-12      瀏覽次數(shù):135

隨著中國(guó)本土細(xì)胞和基因治療產(chǎn)品商業(yè)化進(jìn)程加快,將有更多本土優(yōu)秀的生物技術(shù)公司和產(chǎn)品脫穎而出,同時(shí)也意味著細(xì)胞和基因治療領(lǐng)域競(jìng)爭(zhēng)進(jìn)入到更激烈的優(yōu)勝劣汰階段,產(chǎn)品商業(yè)化價(jià)值直接受到市場(chǎng)檢驗(yàn)。經(jīng)過前幾年快速發(fā)展,目前各主要玩家都在進(jìn)行差異化布局,同時(shí)提升生產(chǎn)和臨床試驗(yàn)研究效率,采用自動(dòng)化解決方案無疑是一條可行性道路。工藝自動(dòng)化可減少細(xì)胞與基因治療產(chǎn)品生產(chǎn)可變性,提高產(chǎn)品穩(wěn)定性,節(jié)約大量時(shí)間,快速推進(jìn)臨床研究和商業(yè)化交付,進(jìn)而讓急需治療的病人受益。


目前市場(chǎng)上,細(xì)胞治療生產(chǎn)領(lǐng)域已經(jīng)有幾款自動(dòng)化生產(chǎn)平臺(tái)來解決工藝生產(chǎn)中問題,同樣需要工藝分析技術(shù)進(jìn)步來提供快速反饋和工藝決策,可有效降低產(chǎn)品制造失敗率。免疫學(xué)檢測(cè)方法在細(xì)胞治療產(chǎn)品研發(fā)和臨床試驗(yàn)研究中發(fā)揮著重要作用,特別是ELISA技術(shù),但是傳統(tǒng)孔板ELISA面臨著很多挑戰(zhàn),缺乏多重細(xì)胞因子檢測(cè)能力、實(shí)驗(yàn)周期長(zhǎng),手動(dòng)操作步驟多和自動(dòng)化程度低。Ella全自動(dòng)微流控ELISA技術(shù)以高自動(dòng)化、高重復(fù)性和操作簡(jiǎn)單等優(yōu)勢(shì)成為傳統(tǒng)ELISA替代方案,可進(jìn)行多重細(xì)胞因子檢測(cè),與其他多因子免疫學(xué)平臺(tái)比也有優(yōu)勢(shì)。




01. Ella細(xì)胞與基因治療應(yīng)用方案




02. 細(xì)胞治療產(chǎn)品應(yīng)用場(chǎng)景

(1)細(xì)胞治療產(chǎn)品生物學(xué)效力檢測(cè):開發(fā)人員采用Ella在體外快速精準(zhǔn)定量細(xì)胞治療產(chǎn)品效力,如檢測(cè)細(xì)胞治療產(chǎn)品與腫瘤靶細(xì)胞共同孵育后IFN-γ表達(dá)量,在早期研發(fā)中采用體外細(xì)胞因子表達(dá)作為替代指標(biāo)進(jìn)行效力檢測(cè)。

(2)藥效學(xué)(PD)生物標(biāo)志物檢測(cè):采用Ella檢測(cè)血清中與腫瘤相關(guān)的細(xì)胞因子的變化,從而間接反映藥效學(xué)結(jié)果。

(3)免疫毒性評(píng)價(jià)研究:根據(jù)現(xiàn)有的臨床前和臨床研究,CAR-T細(xì)胞治療產(chǎn)品具有免疫毒性如細(xì)胞因子風(fēng)暴(CRS),并且其與細(xì)胞治療產(chǎn)品的治療效果相關(guān)。臨床前研究中需要對(duì)不同動(dòng)物模型中獲得的免疫毒性檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行客觀檢測(cè)分析,評(píng)估其非臨床免疫毒性。可采用Ella檢測(cè)血清中IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、INF-γ、TNF-α等細(xì)胞因子水平,以期反映CAR-T細(xì)胞CRS風(fēng)險(xiǎn)。同時(shí),在臨床試驗(yàn)和商業(yè)化產(chǎn)品治療過程中,同樣需要檢測(cè)病人血清中關(guān)鍵細(xì)胞因子釋放,評(píng)估細(xì)胞因子風(fēng)暴和神經(jīng)毒性。

(4)細(xì)胞治療病毒載體滴度檢測(cè)和殘留:雜質(zhì)檢測(cè)采用Ella自動(dòng)化方案可檢測(cè)慢病毒載體(Lentivirus) P24滴度和腺相關(guān)病毒載體(AAV)不同血清型滴度。適用于高通量工藝條件優(yōu)化階段樣本快速檢測(cè),快速獲得數(shù)據(jù)支持實(shí)時(shí)工藝參數(shù)決策。



03. 案例研究

案例1. 西奈山伊坎醫(yī)學(xué)院多發(fā)性骨髓瘤傳奇/強(qiáng)生BCMA-CAR-T臨床研究:采用Ella檢測(cè) CAR-T治療后不同時(shí)間點(diǎn)細(xì)胞因子水平,更精準(zhǔn)反應(yīng)數(shù)據(jù)變化趨勢(shì)。



Cytokine levels and time course after CAR-T cell treatment. 

The time periods associated with cytokine release syndrome (CRS), neutropenic fever and neurotoxicity are annotated in the individual subplots. (a) Time course of IFN-gamma level (pg/mL). (b) Time course of TNFalpha level (pg/mL). (c) Time course of IL-6 level (pg/mL). (d) Time course of IL-10 level (pg/mL). All measurements are from peripheral blood plasma.


案例2. Kite Pharma CAR-T復(fù)發(fā)/難治性大B細(xì)胞淋巴瘤臨床研究-Ella代替Luminex方法更精準(zhǔn)監(jiān)測(cè)細(xì)胞因子變化



案例3. Ella支持Beam公司胞嘧啶堿基編輯(CBE)4個(gè)基因編輯CAR-T臨床前研究




04. Ella細(xì)胞治療產(chǎn)品應(yīng)用技術(shù)優(yōu)勢(shì)



參考文獻(xiàn):

1. Cell therapy manufacturing: process analytic technologies needed to achieve flexible, feedback-driven automation. Current Opinion in Biomedical Engineering, Volume 20, December 2021

2.《CAR-T細(xì)胞治療產(chǎn)品質(zhì)量控制檢測(cè)研究及非臨床研究考慮要點(diǎn)》中國(guó)食品藥品檢定研究院


* 本文轉(zhuǎn)載自「ProteinSimple」微信公眾號(hào)



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